Izbor mlečnokiselinske bakterije za istovremenu proizvodnju α- i β-galaktozidaza

Apstrakt

Galaktozidaze obuhvataju grupu enzima koji poslednjih godina privlače sve veću pažnju zahvaljujući činjenici da katalizuju reakciju hidrolize različitih galakto-oligosaharida prisutnih u širokom spektru proizvoda za prehrambenu i stočnu industriju, čime omogućavaju njihovu bolju svarljivost i iskoristivost. Najefikasnije i najčešće korišćene galaktozidaze vode poreklo iz mikrobnih izvora. Cilj ove studije bio je odabir soja bakterije mlečne kiseline koja se može koristiti za proizvodnju α- i β-galaktozidaza, imajući u vidu da se ove bakterije bez ograničenja mogu koristiti za poboljšavanje svarljivosti proizvoda na bazi soje i mleka. U preliminarnim eksperimentima detektovana je intracelularna aktivnost α- i β- galaktozidaza, a bakterija Lactobacillus reuteri je izabrana kao najadekvatniji proizvođač oba enzima. U narednim eksperimentima, fermentacija je optimizovana u cilju poboljšanja proizvodnje intracelularnih enzima, praćenjem aktivnosti primenom spektrofotometrijskih enzimskih testova. Enzimi su potom okarakterisani sa aspekta optimalnih vrednosti temperature i pH za njihovu maksimalnu hidrolitičku aktivnost. Otkriveno je da najvažniji faktor za proizvodnju enzima predstavlja izbor induktora. Naime, dodavanje laktoze u fermentacionu podlogu dovelo je da indukuje proizvodnju β-galaktozidaze, dok se rafinoza pokazala kao najefikasniji induktor proizvodnje α-galaktozidaza. Dalje unapređenje proizvodnje ovih enzima postignuto je optimizacijom koncentracije inokuluma.